Þakka þér fyrir að heimsækja nature.com. Vafraútgáfan sem þú notar hefur takmarkaðan CSS-stuðning. Til að fá sem bestu upplifun mælum við með að þú notir nýjustu útgáfuna af vafranum (eða slökkvir á samhæfingarstillingu í Internet Explorer). Til að tryggja áframhaldandi stuðning mun þessi síða ekki innihalda stíla eða JavaScript.
Melamín er viðurkennt matvælamengun sem getur verið til staðar í ákveðnum matvælaflokkum, bæði fyrir slysni og af ásettu ráði. Markmið þessarar rannsóknar var að staðfesta greiningu og magngreiningu melamíns í ungbarnablöndu og mjólkurdufti. Alls voru 40 matvælasýni, þar á meðal ungbarnablöndu og mjólkurduft, frá mismunandi héruðum Írans greind. Áætlað melamíninnihald sýnanna var ákvarðað með háafköstum vökvaskiljun með útfjólubláu ljósi (HPLC-UV). Kvörðunarkúrfa (R2 = 0,9925) var smíðuð til að greina melamín á bilinu 0,1–1,2 μg mL⁻¹. Magngreiningar- og greiningarmörkin voru 1 μg mL⁻¹ og 3 μg mL⁻¹, talið í sömu röð. Melamín var prófað í ungbarnablöndu og mjólkurdufti og niðurstöðurnar sýndu að melamínmagn í ungbarnablöndu- og mjólkurduftsýnunum var 0,001–0,095 mg kg⁻¹ og 0,001–0,004 mg kg⁻¹, talið í sömu röð. Þessi gildi eru í samræmi við löggjöf ESB og Codex Alimentarius. Mikilvægt er að hafa í huga að neysla þessara mjólkurvara með minnkaðu melamíninnihaldi hefur ekki í för með sér verulega áhættu fyrir heilsu neytenda. Niðurstöður áhættumatsins styðja þetta einnig.
Melamín er lífrænt efnasamband með sameindaformúluna C3H6N6, unnið úr sýanamíði. Það hefur mjög litla leysni í vatni og er um það bil 66% köfnunarefni. Melamín er mikið notað iðnaðarefnasamband með fjölbreytt úrval af lögmætum notkunum í framleiðslu á plasti, áburði og matvælavinnslubúnaði (þar á meðal matvælaumbúðum og eldhúsáhöldum)1,2. Melamín er einnig notað sem lyfjaflutningsefni til meðferðar á sjúkdómum. Hátt hlutfall köfnunarefnis í melamíni getur leitt til misnotkunar efnasambandsins og gefið innihaldsefnum matvæla eiginleika próteinsameinda3,4. Þess vegna eykur það köfnunarefnisinnihaldið að bæta melamíni við matvæli, þar á meðal mjólkurvörur. Þannig var ranglega ályktað að próteininnihald mjólkur væri hærra en það í raun var.
Fyrir hvert gramm af melamíni sem bætt er við eykst próteininnihald matvæla um 0,4%. Hins vegar er melamín mjög leysanlegt í vatni og getur valdið alvarlegri skaða. Að bæta 1,3 grömmum af melamíni við fljótandi vörur eins og mjólk getur aukið próteininnihald mjólkurinnar um 30%5,6. Þó að melamíni sé bætt í dýra- og jafnvel mannamatvæli til að auka próteininnihald7, hafa Codex Alimentarius nefndin (CAC) og innlend yfirvöld ekki samþykkt melamín sem aukefni í matvælum og hafa skráð það sem hættulegt ef það er kyngt, andað að sér eða frásogast í gegnum húðina. Árið 2012 skráði Alþjóðastofnun Alþjóðaheilbrigðismálastofnunarinnar (WHO) melamín sem krabbameinsvaldandi efni í flokki 2B þar sem það getur verið skaðlegt heilsu manna8. Langtíma útsetning fyrir melamíni getur valdið krabbameini eða nýrnaskaða2. Melamín í matvælum getur myndað flókin efni við sýanúrínsýru til að mynda vatnsóleysanlegar gular kristallar sem geta valdið skemmdum á nýrna- og þvagblöðruvef, svo og krabbameini í þvagfærum og þyngdartapi9,10. Það getur valdið bráðri matareitrun og, í miklum styrk, dauða, sérstaklega hjá ungbörnum og smábörnum.11 Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin (WHO) hefur einnig sett þolanlegan dagskammt (TDI) af melamíni fyrir menn við 0,2 mg/kg líkamsþyngdar á dag byggt á leiðbeiningum CAC.12 Matvæla- og lyfjaeftirlit Bandaríkjanna (US FDA) hefur sett hámarksgildi leifa fyrir melamín við 1 mg/kg í ungbarnablöndu og 2,5 mg/kg í öðrum matvælum.2,7 Í september 2008 var greint frá því að nokkrir innlendir framleiðendur ungbarnablöndu hefðu bætt melamíni í mjólkurduft til að auka próteininnihald í vörum sínum, sem leiddi til mjólkurduftseitrunar og kom af stað landsvíðu melamíneitrunartilviki sem veiktist yfir 294.000 börn og lagði yfir 50.000 inn á sjúkrahús.13
Brjóstagjöf er ekki alltaf möguleg vegna ýmissa þátta eins og erfiðleika í borgarlífinu, veikinda móður eða barns, sem leiðir til þess að ungbarnaþurrmjólk er notuð til að fæða ungbörn. Þess vegna hafa verksmiðjur verið settar upp til að framleiða ungbarnaþurrmjólk sem er eins lík brjóstamjólk og mögulegt er í samsetningu14. Ungbarnaþurrmjólk sem seld er á markaði er venjulega unnin úr kúamjólk og er venjulega gerð með sérstakri blöndu af fitu, próteinum, kolvetnum, vítamínum, steinefnum og öðrum efnasamböndum. Til að vera eins og brjóstamjólk er prótein- og fituinnihald þurrmjólkarinnar breytilegt og eftir tegund mjólkur er hún bætt við efnasambönd eins og vítamín og steinefni eins og járn15. Þar sem ungbörn eru viðkvæmur hópur og hætta er á eitrun er öryggi neyslu mjólkurdufts afar mikilvægt fyrir heilsuna. Eftir melamíneitrunartilfellið hjá kínverskum ungbörnum hafa lönd um allan heim gefið þessu máli mikla athygli og næmi þessa sviðs hefur einnig aukist. Þess vegna er sérstaklega mikilvægt að efla eftirlit með framleiðslu ungbarnaþurrmjólkur til að vernda heilsu ungbarna. Til eru ýmsar aðferðir til að greina melamín í matvælum, þar á meðal háafköstavökvaskiljun (HPLC), rafgreining, skynjunaraðferð, litrófsmælingar og ensímtengd ónæmisgreining með mótefnavaka og mótefni16. Árið 2007 þróaði og birti bandaríska matvæla- og lyfjaeftirlitið (FDA) HPLC aðferð til að ákvarða melamín og sýanúrínsýru í matvælum, sem er áhrifaríkasta aðferðin til að ákvarða melamíninnihald17.
Melamínþéttni í ungbarnablöndu mæld með nýrri innrauðri litrófsgreiningartækni var á bilinu 0,33 til 0,96 milligrömm á kílógramm (mg kg-1). 18 Rannsókn á Srí Lanka leiddi í ljós að melamínmagn í nýmjólkurdufti var á bilinu 0,39 til 0,84 mg kg-1. Að auki innihéldu innflutt ungbarnablöndusýni hæstu gildi melamíns, eða 0,96 og 0,94 mg/kg, talið í sömu röð. Þessi gildi eru undir reglugerðarmörkum (1 mg/kg), en eftirlitsáætlun er nauðsynleg til að tryggja öryggi neytenda. 19
Nokkrar rannsóknir hafa skoðað magn melamíns í írönskum ungbarnablöndum. Um 65% sýnanna innihéldu melamín, að meðaltali 0,73 mg/kg og að hámarki 3,63 mg/kg. Önnur rannsókn leiddi í ljós að magn melamíns í ungbarnablöndu var á bilinu 0,35 til 3,40 μg/kg, að meðaltali 1,38 μg/kg. Almennt hefur verið metið tilvist og magn melamíns í írönskum ungbarnablöndum í ýmsum rannsóknum, þar sem sum sýni innihéldu melamín yfir hámarksgildum sem eftirlitsyfirvöld hafa sett (2,5 mg/kg/fóðri).
Í ljósi mikillar beinnar og óbeinnar neyslu mjólkurdufts í matvælaiðnaði og sérstakrar mikilvægis ungbarnablöndu í fæðingu barna, miðaði þessi rannsókn að því að staðfesta greiningaraðferð melamíns í mjólkurdufti og ungbarnablöndu. Reyndar var fyrsta markmið þessarar rannsóknar að þróa hraða, einfalda og nákvæma megindlega aðferð til að greina melamínmengun í ungbarnablöndu og mjólkurdufti með því að nota háþrýstivökvaskiljun (HPLC) og útfjólubláa (UV) greiningu. Í öðru lagi var markmið þessarar rannsóknar að ákvarða melamíninnihald í ungbarnablöndu og mjólkurdufti sem seld er á íranska markaðnum.
Tækin sem notuð eru til melamíngreiningar eru mismunandi eftir framleiðslustað matvæla. Næm og áreiðanleg HPLC-UV greiningaraðferð var notuð til að mæla melamínleifar í mjólk og ungbarnablöndu. Mjólkurvörur innihalda ýmis prótein og fitu sem geta truflað melamínmælingar. Þess vegna, eins og Sun o.fl. 22 benda á, er nauðsynlegt að nota viðeigandi og árangursríka hreinsunaraðferð áður en mælitæki eru notuð. Í þessari rannsókn notuðum við einnota sprautusíur. Í þessari rannsókn notuðum við C18 dálk til að aðskilja melamín í ungbarnablöndu og mjólkurdufti. Mynd 1 sýnir litrófið fyrir melamíngreiningu. Að auki var endurheimt sýnanna sem innihéldu 0,1–1,2 mg/kg af melamíni á bilinu 95% til 109%, aðhvarfsjafnan var y = 1,2487x − 0,005 (r = 0,9925) og hlutfallslegt staðalfrávik (RSD) gildi voru á bilinu 0,8 til 2%. Fyrirliggjandi gögn benda til þess að aðferðin sé áreiðanleg á rannsakaða styrkbilinu (Tafla 1). Greiningarmörk melamíns (LOD) og magngreiningarmörk (LOQ) voru 1 μg mL⁻¹ og 3 μg mL⁻¹, talið í sömu röð. Að auki sýndi útfjólublátt litróf melamíns frásogsband við 242 nm. Greiningaraðferðin er næm, áreiðanleg og nákvæm. Þessa aðferð er hægt að nota til að ákvarða melamínmagn reglulega.
Nokkrir höfundar hafa birt svipaðar niðurstöður. Þróuð var háafköstavökvaskiljunar-ljósdíóðufylking (HPLC) aðferð til að greina melamín í mjólkurvörum. Neðri magngreiningarmörk voru 340 μg kg−1 fyrir mjólkurduft og 280 μg kg−1 fyrir ungbarnablöndu við 240 nm. Filazzi o.fl. (2012) greindu frá því að melamín greindist ekki í ungbarnablöndu með háafköstavökvaskiljun. Hins vegar innihéldu 8% af mjólkurduftsýnunum melamín í magni upp á 0,505–0,86 mg/kg. Tittlemiet o.fl.23 framkvæmdu svipaða rannsókn og ákvarðuðu melamíninnihald ungbarnablöndu (sýnisnúmer: 72) með háafköstavökvaskiljun-massagreiningu/MS (HPLC-MS/MS) sem um það bil 0,0431–0,346 mg kg−1. Í rannsókn sem Venkatasamy o.fl. framkvæmdu... (2010) var græn efnafræðiaðferð (án asetónítríls) og öfug fasa háafköstavökvaskiljun (RP-HPLC) notuð til að meta melamín í ungbarnablöndu og mjólk. Styrkleikabil sýnisins var frá 1,0 til 80 g/ml og svörunin var línuleg (r > 0,999). Aðferðin sýndi endurheimt upp á 97,2–101,2 yfir styrkleikabilið 5–40 g/ml og endurtekningarnákvæmnin var minni en 1,0% hlutfallslegt staðalfrávik. Ennfremur voru mæld LOD og LOQ 0,1 g mL⁻¹ og 0,2 g mL⁻¹24, talið í sömu röð. Lutter o.fl. (2011) ákvarðuðu melamínmengun í kúamjólk og ungbarnablöndu sem byggir á mjólk með því að nota HPLC-UV. Melamínþéttni var á bilinu < 0,2 til 2,52 mg kg⁻¹. Línulega breytilegt svið HPLC-UV aðferðarinnar var 0,05 til 2,5 mg kg−1 fyrir kúamjólk, 0,13 til 6,25 mg kg−1 fyrir ungbarnablöndu með próteinhlutfall <15% og 0,25 til 12,5 mg kg−1 fyrir ungbarnablöndu með próteinhlutfall 15%. Niðurstöður LOD (og LOQ) voru 0,03 mg kg−1 (0,09 mg kg−1) fyrir kúamjólk, 0,06 mg kg−1 (0,18 mg kg−1) fyrir ungbarnablöndu <15% prótein og 0,12 mg kg−1 (0,36 mg kg−1) fyrir ungbarnablöndu með 15% prótein, með merkis-til-hávaðahlutfall upp á 3 og 1025 fyrir LOD og LOQ, talið í sömu röð. Diebes o.fl. (2012) rannsökuðu melamínmagn í ungbarnablöndu- og mjólkurduftsýnum með því að nota HPLC/DMD. Í ungbarnablöndu voru lægstu og hæstu gildin 9,49 mg kg−1 og 258 mg kg−1, talið í sömu röð. Greiningarmörkin (LOD) voru 0,05 mg kg−1.
Javaid o.fl. greindu frá því að melamínleifar í ungbarnablöndu væru á bilinu 0,002–2 mg kg−1 með Fourier umbreytingar innrauða litrófsgreiningu (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3,5 mg kg−1). Rezai o.fl.27 lögðu til HPLC-DDA (λ = 220 nm) aðferð til að meta melamín og náðu LOQ upp á 0,08 μg mL−1 fyrir mjólkurduft, sem var lægra en gildið sem fékkst í þessari rannsókn. Sun o.fl. þróuðu RP-HPLC-DAD til að greina melamín í fljótandi mjólk með fastfasaútdrátt (SPE). Þeir fengu LOD og LOQ upp á 18 og 60 μg kg−128, talið í sömu röð, sem er næmara en í núverandi rannsókn. Montesano o.fl. staðfesti virkni HPLC-DMD aðferðarinnar til að meta melamíninnihald í próteinuppbótum með magngreiningarmörkum upp á 0,05–3 mg/kg, sem var minna næmt en aðferðin sem notuð var í þessari rannsókn29.
Greiningarstofur gegna án efa mikilvægu hlutverki í umhverfisvernd með því að fylgjast með mengunarefnum í ýmsum sýnum. Hins vegar getur notkun mikils fjölda hvarfefna og leysiefna við greiningu leitt til myndunar hættulegra leifa. Þess vegna var græn greiningarefnafræði (e. green analytical chemistry (GAC)) þróuð árið 2000 til að draga úr eða útrýma skaðlegum áhrifum greiningaraðferða á notendur og umhverfið26. Hefðbundnar aðferðir til að greina melamín, þar á meðal litskiljun, rafgreining, háræðarafgreining og ensímtengd ónæmismæling (ELISA), hafa verið notaðar til að greina melamín. Hins vegar, meðal fjölmargra greiningaraðferða, hafa rafefnafræðilegir skynjarar vakið mikla athygli vegna framúrskarandi næmis, sértækni, hraðs greiningartíma og notendavænni eiginleika30,31. Græn nanótækni notar líffræðilegar leiðir til að mynda nanóefni, sem getur dregið úr myndun hættulegs úrgangs og orkunotkun og þannig stuðlað að innleiðingu sjálfbærra starfshátta. Nanósamsett efni, til dæmis, úr umhverfisvænum efnum, er hægt að nota í lífskynjurum til að greina efni eins og melamín32,33,34.
Rannsóknin sýnir að örútdráttur í föstu formi (SPME) er notaður á áhrifaríkan hátt vegna meiri orkunýtni og sjálfbærni samanborið við hefðbundnar útdráttaraðferðir. Umhverfisvænni og orkunýtni SPME gerir það að frábærum valkosti við hefðbundnar útdráttaraðferðir í greiningarefnafræði og býður upp á sjálfbærari og skilvirkari aðferð við sýnaundirbúning.
Árið 2013 þróuðu Wu o.fl. mjög næman og sértækan yfirborðsplasmónómunarskynjara (mini-SPR) sem notar tengingu milli melamíns og andemamínmótefna til að greina melamín hratt í ungbarnablöndu með ónæmisprófi. SPR lífskynjarinn ásamt ónæmisprófi (sem notar melamín-tengdan nautgripasermisalbúmín) er auðveld í notkun og ódýr tækni með greiningarmörk aðeins 0,02 μg mL-136.
Nasiri og Abbasian notuðu flytjanlegan skynjara með miklum möguleikum í samsetningu við grafenoxíð-kítósan samsett efni (GOCS) til að greina melamín í viðskiptalegum sýnum37. Þessi aðferð sýndi fram á afar mikla sértækni, nákvæmni og svörun. GOCS skynjarinn sýndi fram á einstaka næmi (239,1 μM−1), línulegt svið frá 0,01 til 200 μM, sæknifasta upp á 1,73 × 104 og LOD allt að 10 nM. Ennfremur beitti rannsókn sem Chandrasekhar o.fl. framkvæmdu árið 2024 umhverfisvænni og hagkvæmri nálgun. Þeir notuðu papaya-hýðisþykkni sem afoxunarefni til að mynda sinkoxíð-nanóagnir (ZnO-NP) með umhverfisvænni aðferð. Í kjölfarið var þróuð einstök ör-Raman litrófsgreiningartækni til að ákvarða melamín í ungbarnablöndu. ZnO-NP sem eru unnin úr landbúnaðarúrgangi hafa sýnt fram á möguleika sem verðmætt greiningartæki og áreiðanleg, ódýr tækni til að fylgjast með og greina melamín38.
Alizadeh o.fl. (2024) notuðu mjög næman flúrljómunarpall með málm-lífrænum ramma (MOF) til að ákvarða melamín í mjólkurdufti. Línulega sviðið og neðri greiningarmörk skynjarans, ákvörðuð með 3σ/S, voru 40 til 396,45 nM (jafngildir 25 μg kg−1 til 0,25 mg kg−1) og 40 nM (jafngildir 25 μg kg−1), talið í sömu röð. Þetta bil er vel undir hámarksgildum leifa (MRL) sem sett eru fyrir auðkenningu melamíns í ungbarnablöndu (1 mg kg−1) og öðrum matvæla-/fóðursýnum (2,5 mg kg−1). Flúrljómunarskynjari (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) sýndi meiri nákvæmni og nákvæmari mælingargetu en HPLC39 við að greina melamín í mjólkurdufti. Lífskynjarar og nanó-samsett efni í grænni efnafræði auka ekki aðeins greiningargetu heldur lágmarka einnig umhverfisáhættu í samræmi við meginreglur um sjálfbæra þróun.
Grænar efnafræðireglur hafa verið notaðar við ýmsar aðferðir til að ákvarða melamín. Ein aðferð er þróun á grænni dreifðri fastfasa örútdráttaraðferð með því að nota náttúrulega pólpólýmerið β-sýklódextrín sem er þverbundið við sítrónusýru til að draga melamín 40 á skilvirkan hátt úr sýnum eins og ungbarnablöndu og heitu vatni. Önnur aðferð notar Mannich-viðbrögðin til að ákvarða melamín í mjólkursýnum. Þessi aðferð er ódýr, umhverfisvæn og mjög nákvæm með línulegu bili frá 0,1–2,5 ppm og lágum greiningarmörkum 41. Ennfremur var þróuð hagkvæm og umhverfisvæn aðferð til magnbundinnar ákvörðunar á melamíni í fljótandi mjólk og ungbarnablöndu með því að nota Fourier umbreytingar innrauða litrófsgreiningu með mikilli nákvæmni og greiningarmörkum upp á 1 ppm og 3,5 ppm, talið í sömu röð 42. Þessar aðferðir sýna fram á beitingu grænnar efnafræðireglu við þróun skilvirkra og sjálfbærra aðferða til að ákvarða melamín.
Nokkrar rannsóknir hafa lagt til nýstárlegar aðferðir til að greina melamín, svo sem notkun fastfasaútdráttar og háafköstuvökvaskiljunar (HPLC)43, sem og hraðvirka háafköstuvökvaskiljun (HPLC), sem krefst ekki flókinnar forvinnslu eða jónpara hvarfefna, og dregur þannig úr magni efnaúrgangs44. Þessar aðferðir veita ekki aðeins nákvæmar niðurstöður við ákvörðun melamíns í mjólkurvörum, heldur eru þær einnig í samræmi við meginreglur grænnar efnafræði, lágmarka notkun hættulegra efna og draga úr heildarumhverfisáhrifum greiningarferlisins.
Fjörutíu sýni af mismunandi vörumerkjum voru prófuð í þríriti og niðurstöðurnar eru sýndar í töflu 2. Melamínmagn í ungbarnablöndusýnum og mjólkurduftsýnum var á bilinu 0,001 til 0,004 mg/kg og frá 0,001 til 0,095 mg/kg, talið í sömu röð. Engar marktækar breytingar sáust milli þriggja aldurshópa ungbarnablöndunnar. Að auki greindist melamín í 80% mjólkurduftsins en 65% ungbarnablöndunnar voru menguð af melamíni.
Melamíninnihald í iðnaðarmjólkurdufti var hærra en í ungbarnablöndu og munurinn var marktækur (p < 0,05) (Mynd 2).
Niðurstöðurnar sem fengust voru undir þeim mörkum sem Matvæla- og lyfjaeftirlitið Bandaríkjanna (FDA) hefur sett (undir 1 og 2,5 mg/kg). Þar að auki eru niðurstöðurnar í samræmi við mörk sem CAC (2010) og ESB hafa sett45,46, þ.e. hámarks leyfilegt magn er 1 mg kg-1 fyrir ungbarnablöndur og 2,5 mg kg-1 fyrir mjólkurvörur.
Samkvæmt rannsókn frá árinu 2023 eftir Ghanati o.fl.47 var melamíninnihald í mismunandi gerðum pakkaðrar mjólkur í Íran á bilinu 50,7 til 790 μg kg−1. Niðurstöður þeirra voru undir leyfilegum mörkum FDA. Niðurstöður okkar eru lægri en niðurstöður Shoder o.fl.48 og Rima o.fl.49. Shoder o.fl. (2010) komust að því að melamínmagn í mjólkurdufti (n=49) ákvarðað með ELISA var á bilinu 0,5 til 5,5 mg/kg. Rima o.fl. greindu melamínleifar í mjólkurdufti með flúrljómunarlitrófsmælingu og komust að því að melamínmagn í mjólkurdufti var 0,72–5,76 mg/kg. Rannsókn var gerð í Kanada árið 2011 til að fylgjast með melamínmagni í ungbarnablöndu (n=94) með vökvaskiljun (LC/MS). Melamínþéttni reyndist vera undir ásættanlegum mörkum (bráðabirgðastaðall: 0,5 mg kg−1). Það er ólíklegt að sviksamlegt melamínmagn sem greint var hafi verið aðferð til að auka próteininnihald. Hins vegar er ekki hægt að skýra það með notkun áburðar, tilfærslu á innihaldi íláta eða svipuðum þáttum. Ennfremur var uppruni melamíns í mjólkurdufti sem flutt var inn til Kanada ekki gefinn upp50.
Hassani o.fl. mældu melamíninnihald í mjólkurdufti og fljótandi mjólk á íranska markaðnum árið 2013 og fundu svipaðar niðurstöður. Niðurstöðurnar sýndu að fyrir utan eitt vörumerki af mjólkurdufti og fljótandi mjólk voru öll önnur sýni menguð af melamíni, með magni á bilinu 1,50 til 30,32 μg g−1 í mjólkurdufti og 0,11 til 1,48 μg ml−1 í mjólk. Athyglisvert er að sýanúrínsýra greindist ekki í neinu sýnanna, sem minnkaði líkurnar á melamíneitrun fyrir neytendur. 51 Fyrri rannsóknir hafa metið melamínþéttni í súkkulaðivörum sem innihalda mjólkurduft. Um 94% innfluttra sýna og 77% íranskra sýna innihéldu melamín. Melamínmagn í innfluttum sýnum var á bilinu 0,032 til 2,692 mg/kg, en í írönskum sýnum var á bilinu 0,013 til 2.600 mg/kg. Í heildina greindist melamín í 85% sýna, en aðeins eitt tiltekið vörumerki hafði gildi yfir leyfilegum mörkum.44 Tittlemier o.fl. greindu frá melamíngildum í mjólkurdufti á bilinu 0,00528 til 0,0122 mg/kg.
Tafla 3 sýnir samantekt á niðurstöðum áhættumats fyrir þrjá aldurshópa. Áhættan var minni en 1 í öllum aldurshópum. Því er engin heilsufarsáhætta sem ekki veldur krabbameinsvaldandi áhrifum af melamini í ungbarnablöndu.
Lægri mengunarstig í mjólkurvörum geta stafað af óviljandi mengun við framleiðslu, en hærra gildi geta stafað af vísvitandi viðbótum. Ennfremur er heildaráhætta fyrir heilsu manna af neyslu mjólkurvara með lágu melamínmagni talin lítil. Hægt er að álykta að neysla vara sem innihalda svo lágt melamínmagn feli ekki í sér neina áhættu fyrir heilsu neytenda52.
Í ljósi mikilvægis matvælaöryggisstjórnunar í mjólkuriðnaðinum, sérstaklega hvað varðar verndun lýðheilsu, er afar mikilvægt að þróa og sannreyna aðferð til að meta og bera saman melamínmagn og leifar í mjólkurdufti og ungbarnablöndu. Einföld og nákvæm HPLC-UV litrófsmælingaaðferð var þróuð til að ákvarða melamín í ungbarnablöndu og mjólkurdufti. Aðferðin var sannreynd til að tryggja áreiðanleika hennar og nákvæmni. Greiningar- og magngreiningarmörk aðferðarinnar reyndust nógu næm til að mæla melamínmagn í ungbarnablöndu og mjólkurdufti. Samkvæmt okkar gögnum greindist melamín í flestum írönskum sýnum. Öll greind melamínmagn voru undir leyfilegum hámarksmörkum sem CAC setur, sem bendir til þess að neysla þessara tegunda mjólkurvara sé ekki áhættusöm fyrir heilsu manna.
Öll efnafræðileg hvarfefni sem notuð voru voru af greiningargráðu: melamín (2,4,6-tríamínó-1,3,5-tríazín) 99% hreint (Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri); asetónítríl af hágæðavökvaskiljunargráðu (Merck, Darmstadt, Þýskalandi); útfjólublátt vatn (Millipore, Morfheim, Frakklandi). Einnota sprautusíur (Chromafil Xtra PVDF-45/25, gatastærð 0,45 μm, himnuþvermál 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, Þýskalandi).
Ómskoðunarbað (Elma, Þýskalandi), skilvindu (Beckman Coulter, Krefeld, Þýskalandi) og háþrýstingsvökvaskiljun (HPLC) (KNAUER, Þýskalandi) voru notuð til að undirbúa sýnin.
Notað var háafköstavökvaskiljöfnunartæki (KNAUER, Þýskalandi) útbúið með útfjólubláum skynjara. Greiningarskilyrði fyrir HPLC voru eftirfarandi: Notað var UHPLC Ultimate kerfi útbúið með ODS-3 C18 greiningarsúlu (4,6 mm × 250 mm, agnastærð 5 μm) (MZ, Þýskalandi). HPLC útskilnaðarvökvinn (hreyfanlegur fasi) var blanda af TFA/metanóli (450:50 ml) með rennslishraða 1 ml á mínútu. Greiningarbylgjulengdin var 242 nm. Inndælingarrúmmálið var 100 μL og hitastig súlunnar var 20 °C. Þar sem geymslutími lyfsins er langur (15 mínútur) ætti að gefa næsta inndælingu eftir 25 mínútur. Melamín var greint með því að bera saman geymslutímann og útfjólubláa litrófstopp melamínstaðla.
Staðlað melamínlausn (10 μg/ml) var útbúin með vatni og geymd í kæli (4°C) fjarri ljósi. Þynnið stofnlausnina með hreyfanlegum fasa og útbúið vinnustaðlaðar lausnir. Hver staðlað lausn var sprautuð inn í HPLC kerfið 7 sinnum. Kvörðunarjafna 10 var reiknuð með aðhvarfsgreiningu á ákvörðuðu toppflatarmáli og ákvörðuðum styrk.
Kúamjólkurduft (20 sýni) og sýni af mismunandi vörumerkjum af ungbarnablöndu úr kúamjólk (20 sýni) voru keypt frá matvöruverslunum og apótekum í Íran til að fæða ungbörn á mismunandi aldurshópum (0–6 mánaða, 6–12 mánaða og >12 mánaða) og geymd við kæli (4°C) þar til greining fór fram. Síðan var 1 ± 0,01 g af einsleitu mjólkurdufti vigtað og blandað saman við asetónítríl:vatn (50:50, v/v; 5 ml). Blandan var hrærð í 1 mínútu, síðan hljóðbeitt í ómsuðubaði í 30 mínútur og að lokum hrist í 1 mínútu. Blandan var síðan skilvind við 9000 × g í 10 mínútur við stofuhita og ofanfljótandi vökvinn síaður í 2 ml sjálfvirkt sýnatökuglas með 0,45 μm sprautusíu. Síuvökvinn (250 μl) var síðan blandaður við vatn (750 μl) og sprautaður inn í HPLC kerfið10,42.
Til að sannreyna aðferðina ákvörðuðum við endurheimt, nákvæmni, greiningarmörk (LOD), magngreiningarmörk (LOQ) og nákvæmni við bestu aðstæður. LOD var skilgreint sem sýnisinnihald með tindhæð þrisvar sinnum grunnlínuhávaðastig. Hins vegar var sýnisinnihald með tindhæð 10 sinnum merkis-til-hávaðahlutfallið skilgreint sem LOQ.
Svörun tækisins var ákvörðuð með kvörðunarkúrfu sem samanstóð af sjö gagnapunktum. Mismunandi melamíninnihald var notað (0, 0,2, 0,3, 0,5, 0,8, 1 og 1,2). Línuleiki melamínútreikningsaðferðarinnar var ákvörðuð. Að auki voru nokkur mismunandi stig af melamíni bætt við eyðusýnin. Kvörðunarkúrfan var búin til með því að sprauta stöðugt 0,1–1,2 μg mL⁻¹ af stöðluðu melamínlausn í ungbarnablöndu- og þurrmjólkursýni og R2 hennar = 0,9925. Nákvæmnin var metin með endurtekningarhæfni og endurtekningarhæfni aðferðarinnar og var náð með því að sprauta sýnum fyrsta daginn og þrjá daga þar á eftir (í þríriti). Endurtekningarhæfni aðferðarinnar var metin með því að reikna RSD % fyrir þrjá mismunandi styrkleika af viðbættu melamíni. Endurheimtarrannsóknir voru gerðar til að ákvarða nákvæmnina. Endurheimtarstig með útdráttaraðferðinni var reiknað út frá þremur stigum melamínþéttni (0,1, 1,2, 2) í sýnum af ungbarnablöndu og þurrmjólk9,11,15.
Áætluð dagleg inntaka (EDI) var ákvörðuð með eftirfarandi formúlu: EDI = Ci × Cc/BW.
Þar sem Ci er meðaltal melamíninnihalds, Cc er mjólkurneysla og BW er meðalþyngd barna.
Gagnagreining var framkvæmd með SPSS 24. Eðlileiki var prófaður með Kolmogorov-Smirnov prófinu; öll gögn voru óbreytanleg próf (p = 0). Þess vegna voru Kruskal-Wallis prófið og Mann-Whitney prófið notuð til að ákvarða marktækan mun milli hópanna.
Ingelfinger, Jr. Melamín og áhrif þess á alþjóðlega matvælamengun. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
Lynch, RA, o.fl. Áhrif pH-gildis á flutning melamíns í skálar barna. International Journal of Food Contamination, 2, 1–8 (2015).
Barrett, MP og Gilbert, IH Að beina eitruðum efnasamböndum að innri efnum trypanósóma. Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006).
Nirman, MF, o.fl. Mat á melamín dendrimerum sem lyfjaflutningsferlum in vitro og in vivo. International Journal of Pharmacy, 281(1–2), 129–132(2004).
Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin. Sérfræðingafundir 1–4 til að fara yfir eiturefnafræðilega þætti melamíns og sýanúrsýru (2008).
Howe, AK-C., Kwan, TH og Lee, PK-T. Eituráhrif melamíns og nýrun. Journal of the American Society of Nephrology 20(2), 245–250 (2009).
Ozturk, S. og Demir, N. Þróun nýs IMAC-gleypiefnis til að greina melamín í mjólkurvörum með háafköstum vökvaskiljun (HPLC). Journal of Food Synthesis and Analysis 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. og Imim, A. Einföld litrófsmæling á melamíni í fljótandi mjólk byggð á Mannich grænu viðbrögðum. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Deabes, M. og El-Habib, R. Ákvörðun melamíns í ungbarnablöndu, mjólkurdufti og pangasiussýnum með HPLC/díóðufylkingu litskiljun. Journal of Environmental Analytical Toxicology, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Skinner, KG, Thomas, JD, og ​​Osterloh, JD. Eituráhrif melamíns. Journal of Medical Toxicology, 6, 50–55 (2010).
Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin (WHO), Eiturefnafræði og heilsufarslegir þættir melamíns og sýanúrínsýru: Skýrsla frá samstarfsfundi sérfræðinga WHO/FAO með stuðningi frá Health Canada, Ottawa, Kanada, 1.-4. desember 2008 (2009).
Korma, SA, o.fl. Samanburðarrannsókn á fitusamsetningu og gæðum ungbarnablöndudufts sem inniheldur ný virknibyggingarlípíð og hefðbundinnar ungbarnablöndu. European Food Research and Technology 246, 2569–2586 (2020).
El-Waseef, M. og Hashem, H. Aukin næringargildi, gæðaeiginleikar og geymsluþol ungbarnablöndu með pálmaolíu. Middle East Journal of Agricultural Research 6, 274–281 (2017).
Yin, W., o.fl. Framleiðsla einstofna mótefna gegn melamíni og þróun óbeinnar samkeppnishæfrar ELISA aðferðar til að greina melamín í hrámjólk, þurrmjólk og fóðri. Journal of Agricultural and Food Chemistry 58(14), 8152–8157 (2010).